Plazmīdu vektora 5' lipīgo galu aizpildīšana | |
Klonešanas
vektoru 5' lipīgos galus aizpildīja ar E.coli DNS polimerāzes I Klenova
fragmentu. DNS restrikcijas maisījumam pievieno 1U Klenova fragmentu un 2mM 4dNTP
maisījumu līdz katru nukleotīda koncentrācija ir 0.05 mM. Inkubē 20 minūtes istabas temperatūra un 10 minūtes +37°C . Fermentu inaktivē 20 minūtes. karsējot +70°C . |
|